大枣提取物-大枣多糖提取技术分享:
1、方法一
(1)大枣多糖植物提取试剂选用:蒸馏水、乙醇、乙醚、NaOH溶液、盐酸、三氯乙酸、正丁醇、活性炭、乙酸钾溶液、DEAE(C乙氨基乙)纤维素、米酚、硫酸。
(2)大枣多糖植物提取仪器设备选用:索氏提取器、电热恒温水浴锅、 真空干燥箱、分液霜斗、透析袋、离心机等。
(3)大枣多糖工艺流程:原料一脱脂一水浸规一过滤、浓缩一醉沉一离心一洗一股蛋白质脱色一分级一多糖。
(4)大枣多糖提取过程:
①原料以市场购买的大枣渣干燥品为原料。
②脱脂.称取大枣渣干燥品100g,以95%乙醇作为溶剂回流脱脂三次,将脱脂后的大枣渣置通风处晾干。
③水浸提。向晾干后的大枣渣中加水浸提三次,加水量分别为10倍量、8信证、6倍量,于90~100C依次提取3.5h、2. 5h、2.0h。
④过滤、浓缩。将三次浸提液合并、过滤,除去不溶性杂质,将滤液浓缩至约400mL.
⑤醇沉。在浓缩液中加入95%乙醇,使含醇量为80%,静置过夜。水叫查护
⑥离心、洗涤。离心,收集沉淀。将收集的沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤,干燥得粗多糖。
⑦脱蛋白质。脱蛋白质采用三氯乙酸一正丁醇法。准确称取一定量的粗多糖,缓慢加水,加热直至完全溶解,得多糖水溶液。按多糖水溶液的体积,加入1:1体积比的5%三氯乙酸正丁醇液,摇匀,在分液漏斗中静置分层后,分出下层清液,除去上层正丁醇层及中层杂蛋白。下层清液用2mol/L NaOH溶液中和至中性。
⑧脱色。脱蛋白质后多糖水溶液用盐酸调pH为4.0~6.0,加粉末活性炭1% (对粗多糖干物质),于80C保温30min,然后过滤。
⑨分级。采用DEAE纤维素法。将DEAE-纤维素用0.5mo/L乙酸钾溶波处理成乙酸盐形式,装柱并用蒸馏水平衡。将纯化好的多糖液浓缩至2%5以lomL.上柱,先用蒸馏水洗脱,流速1. 2mL/ min,用本的用苯酚硫酸法检测,至无糖流出。再以0~0. 4mol/L乙酸钾溶液500mL, 分段洗脱或梯度洗脱。分管收集洗脱液,每管收集4mL.按出峰收集组分,分别浓缩、透析、所干燥萃取大枣多糖提取物纯品。